litceysel.ru
добавить свой файл
1 2 ... 5 6
Влияние озон-кислородной смеси на показатели коагулограммы донорской плазмы



А.В. Марченко, А.С. Сутоцкий, С.В. Верещагина

Кафедра трансфузиологии и гематологии СПбМАПО, г. Санкт-Петербург

Филиал ФГУЗ «Сибирский клинический центр» ФМБА России

«Клиническая больница №42», г. Зеленогорск, Красноярский край


Резюме

На образцах донорской плазмы изучено влияние озон-кислородной смеси на ее гемостатические свойства. Озон-кислородная смесь различных концентраций вводилась в размороженную плазму. Озонирование плазмы в дозах от 1500 мкг/л до 8000 мкг/л не влияет на гемостатические свойства плазменных прокоагулянтов. Озонирование плазмы повышает инфекционную безопасность для пациента и может применяться без ограничений при нарушениях гемостаза.


Ключевые слова: озон-кислородная смесь, гемостаз, донорская плазма, стерилизация, плазменные прокоагулянты, коагулограмма.


Известно, что под воздействием озона погибают все виды бактерий, вирусов, грибов и простейших. Бактерицидный эффект связан с окислением фосфолипидов и липопротеидов в оболочках микроорганизмов. Кроме того, озон может проникать внутрь клетки и вступать в реакцию с компонентами цитоплазмы, нарушая пролиферацию бактерий [1, 2]. Кроме того, Белянин И.И. с соавт. (2007) широко применяли в клинической практике различные виды озонотерапии при лечении легочного туберкулеза, т.к. установлено, что озон оказывает бактериостатическое действие на микобактерии [2]. В 1986 году Зе Юан С. с соавт. опубликовали методику обеззараживания крови и ее компонентов озоном [3]. Авторы показали, что обработка компонентов крови при температуре от 4 до 37°С и в концентрации озона от 1 до 100ррm обеспечивает надежную стерилизацию донорской трансфузионной среды. В то же время авторы указывают на повреждающее действие озона на эритроциты при ≪барботаже≫ крови газовой смесью. Влияние озон-кислородной смеси на плазменные прокоагулянты не изучалось.

В этой связи нами изучено влияние озона на показатели скрининговых тестов коагулограммы донорской плазмы, озонирование которой производилось различными концентрациями озона.


Размораживание плазмы осуществляли с помощью аппарата Sahara III. Озон-кислородная смесь производилась с помощью аппарата ≪Медозонс-БМ≫ в концентрациях: 1500 мкг/л; 2000 мкг/л; 3000 мкг/л; 5000 мкг/л; 8000 мкг/л. Озонирование осуществлялось путем введения газовой смеси различных концентраций в размороженную плазму. До и сразу после озонирования плазмы определяли показатели коагулограммы. Для оценки вляния на функциональное состояние плазменных прокоагулянтов фактора временного контакта озон-кислородной смеси, определяли показатели коагулограммы через 0,5 и 1,0 часа после озонирования.

На 8-ми образцах донорской плазмы исследованы значения некоторых показателей коагулограммы (табл. 1).


Таблица 1

Значение некоторых показателей коагулограммы в интактной донорской плазме

Показатели коагулограммы

Значение

АЧТВ, с

47,7 ± 1,6

Протромбиновое время (ПВ), с

13,0 ± 0,2

Тромбиновое время (ТВ), с

22,9 ± 0,61

Орто-фенантролиновый тест (РФМК), мг/100мл

6,7 ± 2,2

Фибриноген (Ф), г/л

2,9 ± 0,1

Из представленных данных в таблице, все исследуемые показатели имеют тенденцию к гипокоагуляции. Вероятно, это связано с наличием в плазме некоторого избытка цитрата натрия. В отдельной серии исследований к размороженной донорской плазме добавили 20 мл озонированного 0,9% натрия хлорида. Существенных отличий, по сравнению с интактной донорской плазмой, не обнаружили. В следующих исследованиях к плазме добавляли озон-кислородную смесь разных концентраций, перемешивали и избыток стравливали в атмосферу (табл. 2). И, наконец, в четырех сериях к плазме добавляли озон-кислородную смесь различных концентраций с экспозицией от 0,5 до 1 часа (табл. 2). Данные серии исследований проводились для того, чтобы установить как влияют на функциональную активность плазменных прокоагулянтов различные концентрации газовой смеси и какое при этом значение имеет временной фактор контакта.



Таблица 2

Влияние различных концентраций озон-кислородной смеси на показатели коагулограммы донорской плазмы




Показатели коагулограммы




Условия взаимодействия

ОКС и плазмы АЧТВ, сек

ПВ, сек

ТВ, сек

РФМК, мг/100мл

Ф, г/л


Интактная плазма

46,3±2,1

12,8±1,1

14,5±1,3

5,0±0,9

2,4±0,3

1500 мкг/л, б/экспозиции

49,3±2,1

12,3±1,1

21,9±1,3

5,0±0,9

2,2±0,3

2000 мкг/л, б/экспозиции

50,5±2,2

11,9±1,1

22,5±1,2

7,0±1,1

2,2±0,2

3000 мкг/л, б/экспозиции

49,0±2,0

13,2±1,0

21,2±1,1

3,0±1,3

2,05±0,2

5000 мкг/л, экс. – 0,5 ч


46,3±2,1

12,6±1,3

15,0±1,1

-

2,55±0,1

8000 мкг/л, экс. – 0,5 ч

45,0±2,2

13,6±1,2

14,5±0,9

-

2,75±0,2

5000 мкг/л, экс. – 1 ч

46,9±1,4

12,8±1,1

14,5±1,1

-

2,2±0,9

8000 мкг/л, экс. – 1 ч

44,9±2,3

13,5±1,1

14,5±1,3

-

2,45±0,7


Из приведенных данных видно, что независимо от концентрации озон-кислородной смеси и условий озонирования, существенных изменений показателей коагулограммы нет. Это дает основание считать, что озонирование крови не оказывает влияния на потенциал коагуляционного гемостаза донорской плазмы, т. к. функциональное состояние плазменных прокоагулянтов остается неизменным. Зарегистрированная тенденция к гипокоагуляции при введении в плазму озонированного 0,9% раствора натрия хлорида, вероятно, обусловлена эффектом разведения плазмы.

Таким образом, применение озон-кислородной смеси возможно в широком диапазоне концентраций для обеззараживания донорской плазмы, что будет способствовать повышению безопасности плазмотрансфузий. Озонированная плазма сохраняет функциональные свойства плазменных прокоагулянтов и с заместительной целью может применяться в комплексной терапии нарушений гемостаза.



ЛИТЕРАТУРА

1. Марченко А.В., Малов А.В., Данилова Е.С. Окислительные методы детоксикации: Уч.пособие. СПб.,2009.-50 с.

2. Белянин И.И., Шмелев Е.И. Озонирование крови в лечении лекарственно устойчивого туберкулеза и сопутствующих заболеваний(гепатиты и сахарный диабет)-М.: Научный мир, 2007.-224 с.

3. Зе Юан С., Болтон Дэвид. Обеззараживание озоном крови и ее продуктов: Патент изобр. № 719187, США, регистрац. 03.04.1985.


Диагностическая значимость определения активности аланинаминотрансферазы донорской крови


Н.Г. Филина, Т.Б. Колотвина, С.А. Титова, Е.Б. Жибурт

Красноярский краевой центр крови №1

Национальный медико-хирургический центр имени Н.И. Пирогова, г. Москва


Резюме

Спустя 6 месяцев повторно обследовали 170 доноров крови с исходно повышенной активностью аланинаминотрансферазы. У 115 (67,6%) активность аланинаминотрансферазы нормализовалась. Ни у одного донора не выявлены специфические маркеры гепатитов B и C.

Современный подход к отбору и обследованию доноров позволяет исключить обязательный скрининг активности аланинаминотрансферазы из практики производственной трансфузиологии.


Ключевые слова: кровь, донор, аланинаминотрансфераза.


Введение

Повышение активности АЛТ является одной из основных причин медицинских отводов от донорства и основной причиной абсолютного брака. Минимальный срок мед. отводов от донорства по причине повышенной активности АЛТ составляет 3 месяца, максимальный – 1 год.

До разработки современных тест-систем скрининга антител к вирусу гепатита С скрининг аланинаминотрансферазы был эффективен [1].

С 1996 года другие развитые страны (за исключением Японии, эндемичной по гепатиту Е) скрининг АЛТ у доноров не практикуют [2–4].

Для оценки качества работы диагностических лабораторий рекомендуют использовать проспективное наблюдение за выявляемостью специфических маркеров инфекций методом ≪случай–контроль≫. Увеличение доли инфицированных лиц в группе с исходным повышением активности АЛТ свидетельствует о дефекте в иммунодиагностическом выявлении HBsAg и антител к вирусу гепатита С [5, 6].



Цель исследования

Определение диагностической значимости повышенной активности фермента как суррогатного маркера вирусных гепатитов в современных условиях.


Материалы и методы исследования

Обследовали 3211 образцов донорской крови, заготовленной выездными бригадами на территории Красноярского края в течение 4 месяцев (с февраля по

май 2005 г.).

Определение активности АЛТ проводилось кинетическим методом на биохимическом фотометре Stat Fax 1904 Плюс с использованием наборов ≪АЛТ Монореагент≫ производства ≪Биокон диагностикс≫ (Германия). Нормальные показатели активности АЛТ – у женщин до 32 Е/л, у мужчин до 42 Е/л.

Определение маркеров вирусных гепатитов (наличие антител к вирусу гепатита С, HBsAg вируса гепатита В) проводилось на тест-системах производства ЗАО ≪Вектор-Бест≫ (г. Новосибирск).

По результатам лабораторного обследования из 3211 образцов крови в 390 (12,1%) были выявлены отклонения от нормы: повышение активности АЛТ (изолированное и в сочетании с маркерами гепатитов) отмечено в 328 образцах (10,2%); наличие HBsAg – в 36 (1,1%); наличие антител к вирусу гепатита С – в 88 (2,7%); наличие HBsAg в сочетании с антиВГС – в 4 (0,1%).

Повышенная активность фермента АЛТ в сочетании с маркерами вирусных гепатитов была отмечена в 70 образцах (21,3%). Повышение АЛТ в сочетании с ВГВ – в 7 (2,1%); в сочетании с ВГС – в 59 (18%); в сочетании с ВГВ и ВГС – в 4 (1,2%) образцах.

Изолированное повышение активности АЛТ выявлено у 258 доноров (78,7%).

Плазму этих 258 доноров с повышенным уровнем АЛТ, а также плазму случайно выбранных 250 доноров с нормальными значениями АЛТ заложили на 6-месячный карантин.

Спустя 6 месяцев доноры были приглашены для контрольного обследования.

Из 258 человек группы лиц с повышенным уровнем АЛТ вернулись для контрольного исследования 170 доноров (65,9%). Из 250 человек контрольной группы – 132 донора (52,8%). Значимо повышенная частота повторной явки доноров с исходно увеличенной активностью АЛТ (c2=9,03; p<0,003) свидетельствует о заинтересованности этой категории доноров в результатах обследования и, косвенно об их приверженности к донорству.


В группе доноров с исходно повышенным значением АЛТ при повторном исследовании активности фермента отмечено повышение от первичного уровня – у 26 человек (15,3%); снижение, но превышение допустимых границ нормы у 29 человек (17,1%); нормальное значение активности АЛТ – у 115 человек (67,6%).

В контрольной группе доноров уровень АЛТ оставался в норме.

У доноров обеих групп, прошедших повторное обследование, специфические маркеры вирусных гепатитов не были обнаружены.

С 2006 года в Красноярском краевом центре крови № 1 (в головном учреждении и в филиалах) введено предварительное (до донации) обследование доноров на определение активности АЛТ кинетическим методом на биохимическом фотометре Stat Fax 1904 Плюс. Доноры с повышенной активностью АЛТ отводятся от донации (табл. 1).


Таблица 1

Медицинский отвод доноров по причине повышения ак тивности АЛТ на этапе предварительного обследования

Показатель

Годы

2006

2007

2008

2009

Количество доноров, прошедших предварительное обследование

17048

15798

17699

24000

Из них АЛТ - положительных

1056

1119

1473

1392

%


6,2

7

8,3

5,8



следующая страница >>